單增李斯特菌llsB基因克隆及序列分析
作者：王欣雨; 尹華; 任靜靜; 李紅歡; 蔣建軍 石河子大學動物科技學院; 石河子832000
摘要：試驗旨在對新疆綿羊腦炎臨床分離株LM90SB2單增李斯特菌llsB基因進行克隆及生物信息學分析,以期進一步完善單增李斯特菌溶血素S的功能研究。根據GenBank中單增李斯特菌F2365基因全長序列(登錄號為:AE017262)設計其特異性引物,利用PCR方法對新疆分離株LM90SB2的llsB基因進行擴增,回收目的基因與pMD19-T載體連接,采用PCR、雙酶切鑒定篩選陽性菌并進行測序,對所獲序列進行同源性比對及遺傳變異分析。結果顯示,新疆分離株LM90SB2的llsB基因序列全長為876 bp,共編碼291個氨基酸;LM90SB2分離株llsB基因核苷酸序列與10-0809、81-0592、81-0558、02-1792、NTSN、02-1289不同分離株同源性均為100%,與CIIMS-PH-1、NRRLB-57603株的同源性均為99.9%,與J1816、R2-502株的同源性為44.7%~45.0%。分子進化樹顯示,LM90SB2菌株llsB基因與血清型為4b的菌株親緣關系較近,聚類為同一分支。蛋白質二級結構預測表明,LM90SB2 llsB蛋白為親水性蛋白,無信號肽,不形成跨膜結構。本試驗成功克隆了LM90SB2株llsB基因,為深入探討該基因功能提供全面的理論依據。
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中國畜牧獸醫雜志
中國畜牧獸醫雜志， 月刊，本刊重視學術導向，堅持科學性、學術性、先進性、創新性，刊載內容涉及的欄目：生物技術、生理生化、動物營養與飼料科學、遺傳繁育、預防獸醫、基礎獸醫等。于1974年經新聞總署批準的正規刊物。
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