基于單個B細胞抗O型口蹄疫病毒單克隆抗體的研制
作者：張雨; 秦曉東; 朱學亮; 殷相平; 李彥敏; 張志東 中國農(nóng)業(yè)科學院蘭州獸醫(yī)研究所家畜疫病病原生物學國家重點實驗室; 甘肅蘭州730046
摘要：為了建立基于單個B細胞制備抗體技術,本研究以O型滅活FMDV為抗原,采集健康C57/BL小鼠脾細胞,經(jīng)過磁珠富集、流式B220+/CD38+/Ig G1+/抗原+分選,獲得單個抗原特異性的B細胞。經(jīng)單細胞巢式PCR反應擴增獲得抗體完整輕、重鏈可變區(qū)序列后,分別構(gòu)建輕/重鏈表達質(zhì)粒,然后共轉(zhuǎn)染HEK-293細胞后,成功獲得3株特異性單克隆抗體,且證明均屬于Ig G1型抗體;ELISA結(jié)果顯示,獲得的3株抗體均能與O型FMDV抗原結(jié)合;免疫熒光試驗證明,3株抗體能夠特異性結(jié)合細胞內(nèi)復制的O型FMDV。本研究成功建立了基于單個B細胞直接制備抗FMDV單抗的方法,為后期開發(fā)特異性單克隆抗體打下了堅實的基礎。
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中國獸醫(yī)科學雜志
中國獸醫(yī)科學雜志， 月刊，本刊重視學術導向，堅持科學性、學術性、先進性、創(chuàng)新性，刊載內(nèi)容涉及的欄目：預防獸醫(yī)學、基礎獸醫(yī)學、研究進展評述等等。于1971年經(jīng)新聞總署批準的正規(guī)刊物。
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