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摘要：本研究參考GenBank中藍舌病毒16型(Bluetongue virus serotype16,BTV-16)標準株RSAvvvv的序列,人工合成編碼BTV-16NS2蛋白的S8基因,將其亞克隆至原核表達載體pPRoEx-HTb中,構建重組表達質粒pPro-NS2,并轉化大腸桿菌BL21進行IPTG誘導表達,并進行可溶性分析。SDS-PAGE結果顯示,表達的rNS2蛋白主要以包涵體的形式存在于菌體中。利用組氨酸標簽純化樹脂獲得了高純度的NS2蛋白,免疫新西蘭白兔制備抗NS2蛋白的多克隆抗體。Westernblot結果顯示,制備的抗NS2蛋白多克隆抗體不僅可與重組表達的rNS2蛋白反應,而且可與BTV感染細胞后的天然NS2蛋白反應。間接免疫熒光結果顯示,該抗體也可與BTV感染C6/36細胞中的天然NS2蛋白反應,且發(fā)現(xiàn)NS2大量分布于C6/36細胞的胞質中。本研究所制備的NS2蛋白的多克隆抗體具有很好的反應性和特異性,為進一步研究NS2蛋白的功能奠定了基礎。