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摘要：目的探討泛素樣含PHD和環(huán)指結(jié)構(gòu)域1(Ubiquitin like with PHD and ring finger domains 1,UHRF1)在肺腺癌(Lung adenocarcinoma)細(xì)胞的增殖、自噬中的作用及其潛在機(jī)制。方法通過(guò)生物信息學(xué)網(wǎng)站(TCGA)檢測(cè)UHRF1在肺腺癌組織中的表達(dá)。qRT-PCR和Western blot檢測(cè)肺腺癌細(xì)胞系(PC-9、A549和H1299)以及人支氣管上皮細(xì)胞(16HBE)中UHRF1的表達(dá)。轉(zhuǎn)染UHRF1-shRNA后,采用CCK-8、克隆形成以及Ki-67檢測(cè)肺腺癌A549細(xì)胞活性和增殖能力的改變;蛋白免疫印記檢測(cè)自噬相關(guān)LC3-I/II、Beclin-1蛋白以及增殖相關(guān)蛋白CDK6、Rb和PCNA蛋白的變化;透射電鏡觀(guān)察敲除UHRF1后A549細(xì)胞中對(duì)于自噬小體的影響。結(jié)果在肺腺癌患者組織中UHRF1表達(dá)明顯高于癌旁組織,而相對(duì)于正常的支氣管上皮細(xì)胞16HBE,肺腺癌細(xì)胞系A(chǔ)549與H1299中UHRF1的mRNA和蛋白水平均明顯升高。此外,CCK-8法和克隆形成實(shí)驗(yàn)表明沉默UHRF1能夠降低肺腺癌細(xì)胞系A(chǔ)549的生長(zhǎng)效率。Ki-67免疫熒光法檢測(cè)結(jié)果顯示敲除UHRF1后A549細(xì)胞增殖能力相對(duì)于正常對(duì)照組明顯降低。此外我們發(fā)現(xiàn),敲除UHRF1導(dǎo)致CKD6和PCNA蛋白水平相對(duì)于Control-siRNA組表達(dá)升高,而Rb蛋白表達(dá)下調(diào)。我們同時(shí)還發(fā)現(xiàn),沉默UHRF1后能夠提高LC3-II/LC3-I的比例,誘導(dǎo)Beclin-1的表達(dá)上調(diào)。沉默UHRF1促進(jìn)A549細(xì)胞中自噬小體的形成。結(jié)論UHRF1在肺腺癌中高表達(dá),沉默UHRF1能夠發(fā)揮抑制增殖的作用。而這種作用可能是通過(guò)促進(jìn)細(xì)胞自噬產(chǎn)生的。