樹鼩脊髓星形膠質細胞的分離鑒定
作者：王璇; 王文廣; 李娜; 袁園; 張志成; 孫曉梅 中國醫學科學院/北京協和醫學院醫學生物學研究所樹副種質資源中心; 中國醫學科學院醫學生物學研究所實驗樹齣標準化與應用研究省創新團隊; 云南省眼科疾病防治研究重點實驗室; 昆明650118
摘要：目的建立樹鼩脊髓來源的星形膠質細胞的體外分離、鑒定方法以及原代培養技術。為體外利用樹鼩星形膠質細胞開展相關研究提供實驗材料。方法給新生樹鼩實施安死術后采集脊髓組織,于解剖顯微鏡下去除脊髓膜和血管,減少成纖維細胞、血管內皮細胞和紅細胞的影響,然后使用胰蛋白酶和DNaseⅠ聯合消化眷髓組織,分離培養。根據星形膠質細胞和成纖維細胞、小膠質細胞的貼壁時間差異,使用差速貼壁法去除成纖維細胞;然后在細胞鋪滿后,使用恒溫搖床振蕩的方式去除少突膠質細胞;通過連續3次純化,去除神經元。對所培養的細胞進行膠質纖維酸性蛋白(GFAP)細胞免疫熒光染色鑒定。結果采用胰蛋白酶和DNaseⅠ聯合消化后差速貼壁培養,能夠分離獲得星形膠質細胞。細胞具有典型的原漿型和纖維型特征,原漿型呈多角狀,突起少而粗壯;纖維型突起豐富且向外鋪展開;細胞免疫熒光結果顯示GFAP表達陽性,且純度可達到95%。結論成功建立了樹鼩的脊髓星形膠質細胞的體外分離純化培養方法。
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實驗動物與比較醫學雜志
實驗動物與比較醫學雜志， 雙月刊，本刊重視學術導向，堅持科學性、學術性、先進性、創新性，刊載內容涉及的欄目：創刊40周年專家論壇、創刊40周年專題：各地實驗動物科學發展、論著:人類疾病動物模型、探索與實踐:生物安全、探索與實踐:實驗動物管理、短篇交流等。于1981年經新聞總署批準的正規刊物。
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