无码人妻视频一区二区三区免_精品久久久久久无码一区二区_国产成人一二三区免费看_在线播放国产一区二区三区

摘要：目的:利用CRISPR/Cas9基因編輯技術敲除人肝癌細胞HepG2中的四個半LIM結構域蛋白1(FHL1)基因,構建FHL1基因敲除的HepG2穩定細胞株。方法:根據CRISPR/Cas9靶點設計規則,設計特異性識別FHL1基因第三外顯子相關序列的上下游小向導RNA,構建真核重組表達質粒,測序鑒定后,將重組質粒包裝慢病毒感染HepG2細胞,用嘌呤霉素抗性篩選穩定敲除FHL1基因的細胞株,用免疫印跡法鑒定HepG2細胞中FHL1基因的敲除效果,利用生長曲線實驗和劃痕實驗檢測基因敲除對細胞生長和遷移的影響。結果:篩選出敲除FHL1基因的HepG2細胞株,且FHL1基因敲除顯著促進細胞的增殖和遷移。結論:利用CRISPR/Cas9技術獲得了內源FHL1基因敲除細胞株,初步實驗提示敲除FHL1基因可以促進肝癌細胞增殖和遷移,為后續研究FHL1在肝癌中的功能奠定了基礎。