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摘要：【目的】明確轉GbVe1基因棉花的插入位點序列特征。【方法】Southern雜交篩選低拷貝基因插入的轉基因棉花株系,以hiTAIL-PCR(Polymerase chain reaction)獲取其T-DNA側翼序列,然后根據獲得的T-DNA側翼序列設計特異PCR引物,驗證插入位點的準確性。【結果】Southern雜交候選了T-DNA低拷貝插入的3個轉基因棉花株系,hiTAIL-PCR分離到RB端側翼序列(119~1 018 bp)、LB端側翼序列(243~516 bp);側翼序列的AT堿基含量在63%以上。轉基因株系7/100826-152和12/100826-393插入位點都位于Gohir.D01G157600.1內含子上。轉基因株系1/w-ch14插入位點分別位于Gohir.D01G157600.1內含子和A12染色體的基因間隔區中。T-DNA在Gohir.D01G157600.1內含子的插入事件造成了21 bp堿基的基因組序列缺失。T-DNA到側翼序列的PCR產物證明Gohir.D01G157600.1上的插入位點真實可靠。【結論】hiTAIL-PCR獲取了轉GbVe1基因棉花的T-DNA側翼序列,提供了T-DNA插入位點位于Gohir.D01G157600.1基因內含子的特異性檢測引物。