四種鱗翅目害蟲精氨酸激酶基因的表達譜及基于RNAi的功能分析
摘要：【目的】精氨酸激酶(arginine kinase,AK)(EC2.7.3.3)是昆蟲體內重要的磷酸原激酶(能量代謝調節因子),也是唯一能夠形成有效ATP的磷?；w,起著與脊椎動物中肌酸激酶相同的作用。本研究旨在了解鱗翅目害蟲AK基因的表達和功能?！痉椒ā坷胵RT-PCR方法測定AK基因在大螟Sesamia inferens、二化螟Chilo suppressalis、甜菜夜蛾Spodoptera exigua和斜紋夜蛾Spodoptera litura這4種鱗翅目害蟲不同發育階段和3齡幼蟲不同組織中的表達譜;通過終點法檢測了這4種害蟲不同發育階段和幼蟲不同組織中的AK酶活性;采用RNAi技術抑制該基因的表達并分析其功能?！窘Y果】AK基因在大螟、二化螟、甜菜夜蛾和斜紋夜蛾這4種鱗翅目昆蟲的不同發育階段和3齡幼蟲不同組織中均有表達,說明該基因的表達不具有發育時期和組織特異性。不同發育時期和3齡幼蟲不同組織中AK酶活性與基因表達量變化趨勢大體一致。注射以AK基因為靶標的dsRNA6d后,4種害蟲體內AK基因的mRNA表達下降30%~50%,AK酶活性降低30%左右;14d后幼蟲的死亡率達50%左右,顯著高于對照組幼蟲的死亡率。【結論】AK基因在上述4種鱗翅目害蟲中為組成型表達,RNAi抑制AK基因的表達可導致4種害蟲的幼蟲死亡,研究結果為開發以AK基因為靶標的鱗翅目害蟲防治新技術提供了理論依據。
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