環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增結(jié)合核酸級聯(lián)侵入反應(yīng)和納米金探針顯色技術(shù)快速檢測腦膜炎奈瑟菌
摘要：目的 建立一種適合現(xiàn)場使用、靈敏、特異的腦膜炎奈瑟菌（N.men）檢測方法。 方法 針對N.men的ctrA基因設(shè)計(jì)環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增（LAMP）特異性引物和核酸侵入反應(yīng)探針，對LAMP擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行核酸級聯(lián)侵入反應(yīng)和納米金顆粒探針雜交檢測。優(yōu)化反應(yīng)體系和反應(yīng)條件后進(jìn)行敏感性和特異性實(shí)驗(yàn)，并與Real-Time PCR檢測方法進(jìn)行比較。 結(jié)果 以核酸級聯(lián)侵入反應(yīng)和納米金顆粒探針顯色技術(shù)檢測LAMP擴(kuò)增產(chǎn)物和毛細(xì)管電泳法具有相同的敏感性和特異性；LAMP結(jié)合核酸級聯(lián)侵入反應(yīng)和納米金探針顯色技術(shù)的檢測敏感性為10 copies DNA分子/反應(yīng)，且與其他病原體之間無交叉反應(yīng)。在臨床樣本檢測方面，LAMP結(jié)合核酸級聯(lián)侵入反應(yīng)和納米金探針顯色技術(shù)與Real-Time PCR檢測效果相當(dāng)。 結(jié)論 結(jié)合LAMP、核酸級聯(lián)侵入反應(yīng)和納米金探針顯色技術(shù)建立的N.men檢測方法靈敏、特異，無需特殊儀器，適用于基層檢測和現(xiàn)場快速檢測。
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