骨質(zhì)疏松大鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞膜片制備過程中纖維連接蛋白表達(dá)檢測
摘要：目的探討骨質(zhì)疏松大鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞(BMSC)膜片體外構(gòu)建過程中纖維連接蛋白(FN)的表達(dá)情況。方法體外分離培養(yǎng)骨質(zhì)疏松大鼠BMSC,采用含50μg/mL維生素C的培養(yǎng)基連續(xù)培養(yǎng)構(gòu)建細(xì)胞膜片,通過倒置顯微鏡和組織學(xué)染色對細(xì)胞膜片進(jìn)行形態(tài)學(xué)觀察;利用免疫熒光染色、實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)及Western-blot檢測細(xì)胞外基質(zhì)中FN在基因和蛋白水平的表達(dá)情況。結(jié)果采用含維生素C的培養(yǎng)基連續(xù)培養(yǎng)可獲得含多層細(xì)胞及豐富胞外基質(zhì)的BMSC細(xì)胞膜片。免疫熒光染色、實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)及Western-blot檢測結(jié)果顯示所構(gòu)建的細(xì)胞膜片高表達(dá)FN。結(jié)論以濃度為50μg/mL的維生素C培養(yǎng)基連續(xù)培養(yǎng)可成功構(gòu)建骨質(zhì)疏松大鼠BMSC細(xì)胞膜片,膜片富含F(xiàn)N,有望應(yīng)用于骨質(zhì)疏松狀態(tài)下牙槽骨缺損的治療。
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福建醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)雜志
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